物體發什么顏色的光是因為它吸收了其它顏色的光而反射該顏色的光，如FITC能吸收可見光譜中的藍色光，而發射黃綠色熒光。熒光的強度遠弱于激發光，波長要長于激發光，這一點大家都知道。激發濾光片的作用是除去波長與熒光光譜段相同的那部分激發光，即激發光中長波段。發射濾光片/接收濾光片：從熒光中除去短波部分激發光(注意，仍是針對激發光)。

所以，熒光設備應是如此工作，激發光源發射出激發光，到達激發濾光片后被除去與發射熒光重合部分的長波段，然后到達熒光團，發射長波熒光，再到達發射濾光片，被除去低于此熒光波長的短波激發光，得到波段狹窄的熒光，從而不受強度遠大于熒光本身的激發光干擾。

濾光片如標有cut-in 515，則表示515以上的波段能通過，依此類推。而透析袋是cut-off 5KDa，表示5000以上分子量不能通過。但濾光片并不能精確截止某個波段的光，而只是一個正態分布高斯峰的最高點。

截止型濾光片：通過長于某個特定波長的濾光片，如只能通過大于700nm的激發光。

帶通濾光片：通過某個特定波長范圍內的濾光片，如700-800nm。